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移码突变(translocation)
指片段中某一位点插入或丢失一个或几个(非3或3的倍数)碱基对时,造成插入或丢失位点以后的一系列编码顺序发生错位的一种突变。它可引起该位点以后的遗传信息都出现异常。发生了移码突变的基因在表达时可使组成多肽链的氨基酸序列发生改变,PIK3CA(H1047R),从而严重影响蛋白质或酶的结构与功能。类诱变剂如原黄素、吖黄素、橙等由于分子比较扁平,能插入到DNA分子的相邻碱基对之间。
无论是碱基置换突变还是移码突变,都能使多肽链中氨基酸组成或顺序发生改变,进而影响蛋白质或酶的生物功能,使机体的表型出现异常。
通过诱发使生物产生大量而多样的基因突变,从而可以根据需要选育出优良品种,这是基因突变的有用的方面。在化学诱变剂发现以前,植物育种工作主要采用辐射作为诱变剂;化学诱变剂发现以后,诱变手段便大大地增加了。
突变的流程
1. 在dam+ 阳性的宿主菌E. coli.增殖获得化的模板DNA
2. 设计2条互补匹配的、突变位点居中央的突变引物
3. 加入反应组分如buffer、 template、dNTP、complementary mutagenic primers、QuikSolution&QuikChange Lightning Enzyme
4. 运行反应
5. Dpn I 消化化的模板
6. 转化感受态细胞、铺板筛选
7. 提取 DNA、测序鉴定
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