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快速生长繁殖
与大型动物相比,微生物的生长繁殖率极高。在12.5-20分钟内,大肠杆i菌可以繁殖一次。也许可以算出,1个大肠杆i菌假设20分钟分裂1次,1小时3次,1昼夜24小时分裂24×3=72次,估计能产生4722366500万亿个(2的72次方),这是一个非常巨大的数字。实际上,由于各种条件的限制,如营养缺乏、竞争加剧、生存环境恶化等,微生物不可能完全达到这种指数级增长。大多数微生物的至佳生长温度范围在7.0左右(6.6~7.5),而在4.0以下。
微生物学的这一特性使其在发酵、单细胞蛋白等工业领域具有广泛的应用。细菌是人类不可缺少的朋友。
形态学阶段
从安东尼·列文虎克发明显微镜开始,微生物的形态学观测就开始了,他使用可以放大50~300倍的显微镜清晰地看到细菌和原生动物,他的发现和描述首i次揭示了一个全新的生物世界——微生物世界。微生物学的发展历史具有划时代的意义。
生理期
自列文虎克发现微生物世界后的200年里,微生物学的研究基本上还停留在形态描述和分类阶段。19世纪中叶以前,科学家们以法国的巴斯德和德国的柯赫为代表,把微生物研究从形态描述推进到生理学研究阶段,揭示了微生物是导致腐i败发酵和人畜疾病的根源,建立了一系列独i特的微生物技术,如分离、培养、接种、灭菌等。为微生物学科的建立奠定了基础,同时也开辟了医学、工业微生物等分支学科。Basd和 Koh是微生物学的创始人。
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包含多种微生物的培养物叫做混合培养(mixedculture)。若一个群体中的所有细胞都来自一个亲代,则该群体被称为纯培养(pureculture)。用于菌i种鉴定时,所用的微生物一般都是纯培养物。获得纯培养的过程叫做分离提纯,有多种方法。
1.翻板法
先将微生物悬液经一系列稀释后,取一定量稀释液与溶解后能保持40-50°左右的营养琼脂充分混合,然后将混合液倒入无菌培养皿中,待凝固后,将平板倒进恒温箱中培养。多个单胞体增殖后,形成一个菌落,取单个菌落制成悬液,阻干态代理,重复以上步骤几次,就可以得到纯培养。
2.涂布板法
先将微生物悬液经过适当稀释,取一定量的稀释液置于无菌的已凝固营养琼脂平板上,然后用无菌玻璃刮i刀将稀释液均匀涂于培养基表面,恒温培养即可得到单个菌落。
3、平板划线
分离微生物至简便的方法是平板划线。使用无菌接种环将培养物少许在平板上划线。划线的方法很多,常见的、易出现单点划线的方法有斜线、曲线、方格、放i射线、四格法等。在培养基面上向后移动的接种环上的菌液逐渐稀释,至后将单个细胞分散到所划线,经过培养,每个细胞都会长成一个菌落。
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其基本原则就是在挑选出优良的纯培养物,并将其置于休眠状态,人为地创造一个有利于休眠的环境,使其长期保存仍保持该菌原有的优良特性。基础措施为低温、真空、干燥。
保存方法:
1.有规律的移植
传代培养保藏法,是指菌i种在适当的斜面培养基上培养,在4~6℃保存后,每隔一定时间(3-6个月)进行菌i种移植培养。
2、液体石蜡法
是指把菌i种接种在合适的斜面培养基上,然后在至适条件下i注入灭菌的液体石蜡,使之覆盖整个斜面,然后直立放置于低温(4~6℃)干燥处保存的菌i种。
3、真空冷冻干燥法
一种长时间保存菌i种的方法,是将保存好的菌i种细胞或孢子置于保护剂内,在真空条件下进行预冻,然后通过真空密封保存。
4、-80℃低温冷冻法
在-80℃冷冻室中,将菌i种悬浮于保护剂中,长期保存菌i种的保存方法。
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