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ELISA法是免l疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传l染病、寄生l虫病及非传l染病等方面的免l疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血l清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗l体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,
线性关系cAMP浓度为16.0pmol/mL的样品,用0.1M HCl进行连续七次1:2梯度稀释。将实际的cAMP浓度和测定的cAMP浓度绘制图表。该直线的斜率为1.000,相关系数为0.999。
交叉反应
部分相关化合物的交叉反应由竞争ELISA测定。将可能的交叉反应物溶解到试剂盒分析缓冲液中,浓度从500pmol/mL至500,000pmol/mL。这些样品通过乙酰化在cAMP竞争分析中被测定,通过比较样品中交叉试剂的实际浓度,可以计算出交叉反应,并用百分比(%)表示。
试剂准备
1. 非乙酰化cAMP标准品
将5000 pmol/mL cAMP标准品溶液平衡至室温。从#1至#6标记六只洁净试管。移取475μL 0.1M HCl到#1号试管,400μL到#2至#6号试管。加入25μL 5000 pmol/mL cAMP标准品到#1管中,剧烈涡旋震荡。从#1管中取出100μL溶液至#2管中,涡旋震荡。以此类推,重复上步操作,梯度稀释至#6管。
经以上操作,#1至#6管中cAMP标准品浓度分别为250,50,10,人环磷酸腺苷 cGMP ELISA,2,0.4和0.08 pmol/mL(详见cAMP实验稀释详情键盘纸)。稀释过的标准品需在30分钟内使用。
标记一只试管作为无标准品空白对照(NSB)。移取600μL 0.1M HCl到NSB管中。
2. 洗涤液
将15 mL 10×洗涤液储液加到135 mL去离子水中,稀释成工作液。稀释液可在室温保存至试剂盒有效期限,或者3个月。
人环磷酸腺苷 cGMP ELISA-neweast由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。武汉纽斯特生物技术有限公司为客户提供“G蛋白活性,cAMP和cGMP ELISA试剂盒,蛋白点突变”等业务,公司拥有“纽斯特”等品牌,专注于生物化工等行业。,在湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号光谷生物城B3-3栋3楼的名声不错。欢迎来电垂询,联系人:黄经理。