Rab5C kit-武汉纽斯特公司

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储存条件

试剂盒的成分在试剂盒的有效期限内必须存放于4°C条件下保存。

试剂（试剂盒内不提供，由实验者自行配置）

1.  刺激和未刺激的细胞裂解物；

2.  蛋白酶抑制l剂；

3.  4 °C 摇杆或者摇床；

4.  0.5 M EDTA (pH 8.0)；

5.  1 M MgCl2；

6.  2X reducing SDS-PAGE sample buffer；

7.  电泳和免l疫印迹相关试剂；

8.  免l疫印迹缓冲液TBST (10 mM Tris-HCl， pH 7.4，Rab5C kit， 0.15 M NaCl， 0.05%

Tween-20)；

9.  免l疫印迹封闭缓冲液 (TBST containing 5% 脱脂奶粉 or 3% BSA)；

10. PVDF或硝l酸纤维素膜；

11.  二抗；

12.  ECL 检测试剂；

分析原理

基于构型特异性抗Gα13-GTP的NewEast生物科学Gα13活化检测试剂盒从细胞提取物或体外检测活性Gα13-GTP水平的单克l隆抗l体GTPγS负载Gα13活化试验。简单地说，抗活性Gα13小鼠单克l隆抗l体用含有Gα13-GTP的细胞裂解液培养。结合的活性Gα13将被蛋白质A/G琼脂糖。用兔抗α13多克l隆抗l体免l疫印迹法检测沉淀的活性Gα13。

检测原理

    武汉纽斯特生物技术有限公司的Cdc42活性检测试剂盒主要是利用识别蛋白特异形态的Cdc42-GTP单克l隆抗l体特异性的去检测细胞提取物或者体外的（样品需要进行GTPγS活化处理）活性Cdc42-GTP的水平。简言之，特异性识别Cdc42活化构象的鼠单克l隆抗l体可以特异性结合细胞裂解液中的Cdc42-GTP活性蛋白，然后利用protein A/G将抗原抗l体的结合物吸附下来，再利用特异性识别Cdc42活化构象的兔多克l隆抗l体进行免l疫印迹分析进行检测。